微生物對待測化合物濁度分析圖像顯微鏡
平板法和比濁度的比較
三十多年來測定抗生素的經(jīng)驗證明,生長反應(yīng)中的一種,比濁法
或擴(kuò)散法,可應(yīng)用于大多數(shù)樣品的測定。其他反應(yīng)的應(yīng)用,相當(dāng)罕見
。
當(dāng)將比濁法或平法(擴(kuò)散)法應(yīng)用于測定純凈物質(zhì)時,這兩·種方
法同樣都能滿足需要,也能有大致相同的準(zhǔn)確度。當(dāng)應(yīng)用于不純物質(zhì)
時,這兩種方法可能得到稍微不同的結(jié)果。不純物質(zhì)中可能包括提高
或降低微生物對待測化合物反應(yīng)的物質(zhì)。這樣一些!物質(zhì)在比濁法測定
中,.除非這些不純物質(zhì)的影響得到補償,或者它們的影響得以消除
,否則,當(dāng)有不純物質(zhì)存在時,測定將是有誤差的。擴(kuò)散法常常(但不
是永遠(yuǎn))對干擾物質(zhì)的存在比較不敏感。如果待測化合物比干擾物質(zhì)擴(kuò)
’散得更快,那么,確實會出現(xiàn)這種情況。如果樣品的效價與被測定
的濃度無關(guān),如果向幾種濃度的樣品中加進(jìn)的低濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,在測
定的誤差的范圍內(nèi)可以回收,那么,可以假定測定不受干擾。
特別難以處理的情況是,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品以不同的比例含有一種復(fù)
合物中的幾種復(fù)合物質(zhì)。制定規(guī)章的有關(guān)機構(gòu),可能利用不同組成的
標(biāo)準(zhǔn)品,這些標(biāo)準(zhǔn)品也可能不同于制造商在測定同一樣品時所用的標(biāo)
準(zhǔn)品;此外,樣品的組成可能與標(biāo)準(zhǔn)品的組成有很大的不同:這二切
更增加了混亂。結(jié)果是,用一批桿菌肽的測定結(jié)果有三個不同數(shù)值。
買主是第三方。這三方也可能使用不同的平板法。誰的結(jié)果準(zhǔn)確,每
一方的結(jié)果都準(zhǔn)確,因為微生物學(xué)測定法是借助標(biāo)準(zhǔn)品測量活性的。
應(yīng)用共同的標(biāo)準(zhǔn)品和方法,就可能得到一致的效價。新霉素和其他以
混合物形式存在的抗生素,也會遇到同樣的爭論。
當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品本質(zhì)上是純凈物質(zhì)時,例如青霉素G和紅霉素,測
定方法是不重要的。在供應(yīng)者和消費者或者還有制訂規(guī)章出機構(gòu)之間
,對它們的效價持不同意見的情況,是非常罕見的。
雖然平板法或比濁法,通常都可以采用,但是,究竟選用哪一種
方法,可能取決于分析工作者的喜愛和現(xiàn)有的設(shè)備。一個裝備有使用
大平板法的設(shè)備并具有實踐經(jīng)驗的實驗室,將傾向于使用平板法而刁
;用其他方法。現(xiàn)代比濁法相當(dāng)準(zhǔn)確。與平板法相比,要達(dá)到相同的
精確度,只需要花費較少的勞動.具有半自動或全自動比濁測定設(shè)備
的實驗室,將盡可能多地應(yīng)用比濁法測定樣品。因為比濁法的效率更
高,因此,只有比濁法不能應(yīng)用時,才使用平板法。